Медведка
Домашняя страница Обратная связь Карта сайта



Бактериоскопический метод

ПРЯМАЯ БАКТЕРИОСКОПИЯ МАЗКОВ, ОКРАШЕННЫХ ПО ЦИЛЮ-НИЛЬСЕНУ

Бактериоскопическое исследование мокроты начинается с приготов­ления мазка. Для этого мокроту кипятят с гидрокарбонатом натрия и центрифугируют для получения осадка, который стеклянными палочка­ми переносят на предметное стекло.

МБТ — грамположительные микроорганизмы.

Для обнаружения МБТ мазок мокроты высушивают, фиксируют над пламенем спиртовки, после чего окрашивают по Цилю-Нильсену.
Методика окрашивания мазка по Цилю-Нильсену. Карболовый рас­твор фуксина наливают на препарат в большом количестве и подогревают над пламенем спиртовки до появления паров. Затем краску сливают, пре­парат промывают в воде и обесцвечивают в 5 % растворе серной кислоты или солянокислом растворе спирта. При этом все бактерии и морфологические элементы препарата, кроме МБТ, обесцвечиваются. Мазок промывают проточной водой, высушивают и докрашивают раствором метиленового синего в течение 1—2 мин, после чего вновь промывают и высушивают.

Препарат изучают под иммерсионным объективом микроскопа. Для этого на мазок наносят каплю кедрового или синтетического им­мерсионного масла, чтобы создать одинаковую оптическую среду меж­ду линзой объектива и препаратом. МБТ окрашены в красный цвет, а остальные морфологические элементы препарата и бактерии — в бледно-синий.

Недостатком метода является то, что он дает возможность обнаружить МВТ, когда в 1 см3 мокроты содержится не менее 5000-10000 МВТ при условии, что просмотрено 300 полей зрения. Если в 1 мл мокроты содержится 100000 микробных тел, то их можно обнаружить, просмотрев 100 полей зрения. При небольшом количестве МВТ в мокроте метод прямой бактериоскопии мазков, окрашенных по Цилю-Нильсе­ну, неэффективен. Исследование мокроты необходимо проводить трехкратно в тече­ние 2-3 дней подряд.

МЕТОД ФЛОТАЦИИ

В случае необходимости применяют метод флотации (от франц. - плавать на поверхности воды, лат. fluctuo — носиться на волнах), который основан на феномене встряхивания двух жидкостей с разным удельным весом: более легкая жидкость всплывает на поверхность одновременно с МВТ, которые находятся в суспензии. Для исследования методом фло­тации готовят водную суспензию патологического материала с углеводо­родом (ксилолом или бензолом), который имеет меньший удельный вес, чем вода. После встряхивания суспензии на поверхность воды всплывает сливкообразная пена с МВТ, которую пипеткой наносят на предметное стекло. Слой пены на предметном стекле высушивают и наносят новый слой. Пену наслаивают 5-6 раз, после чего мазок фиксируют и окраши­вают по Цилю-Нильсену.

ЛЮМИНЕСЦЕНТНАЯ МИКРОСКОПИЯ

Более эффективным методом обнаружения МВТ является люминес­центная микроскопия. Суть метода заключается в способности МВТ, ок­рашенных специальными флуоресцентными красителями (аурамином, родамином), светиться при облучении ультрафиолетовыми лучами. Пре­имуществом метода люминесцентной микроскопии является возмож­ность проведения исследований при малых увеличениях микроскопа, что обеспечивает просмотр в короткий срок большего количества полей зрения, чем при обычной микроскопии. Вероятность обнаружения МБТ увеличивается на 10-15 % по сравнению с обычной бактериоскопией и на 8 % — по сравнению с методом флотации.

Используют люминесцентный микроскоп при малых увеличениях. На темном фоне видны золотисто-желтые МБТ.

ФАЗОВО-КОНТРАСТНАЯ МИКРОСКОПИЯ

Фазово-контрастная микроскопия — единственный микроскопичес­кий метод исследования, позволяющий наблюдать МВТ и их биологичес­ки измененные формы в живом состоянии. Для проведения такого иссле­дования применяют специальное фазово-контрастное устройство.

Читать далее: Бактериологический метод
Вернуться на главную страниу



Уважаемый посетитель, Вы зашли на сайт как незарегистрированный пользователь
Мы рекомендуем Вам зарегистрироваться либо войти на сайт под своим именем.
  Просмотров: 2 130 Отзывов (0) Распечатать